¿Podría clasificar cada uno de los espermatozoides y otros elementos de esta fotografía, definiendo las anormalidades de cada espermatozoide según la clasificación de la OMS?
La respuesta en 3 semanas !!
03 abril 2013
Morfología espermática
Problema morfología espermática
¿Podría clasificar cada uno de los espermatozoides y otros elementos de esta fotografía, definiendo las anormalidades de cada espermatozoide según la clasificación de la OMS?
La respuesta en 3 semanas !!
¿Podría clasificar cada uno de los espermatozoides y otros elementos de esta fotografía, definiendo las anormalidades de cada espermatozoide según la clasificación de la OMS?
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07 marzo 2013
Colesterol LDL calculado
Nueva fórmula mejorada para el cálculo del colesterol LDL
La determinación del colesterol LDL (LDLc) es una de las más solicitadas para la evaluación del riesgo cardiovascular.
Durante mucho tiempo se ha utilizado para calcularlo la conocida fórmula de Friedewald, desarrollada por el autor y sus colegas en 1972.
Esta conocida fórmula necesita de los valores del colesterol Total (CT), del colesterol HDL (HDLc) y de los triglicéridos (TG) para su cálculo. Es la siguiente:
LDLc= CT-(HDLc+0,2*TG)
Para el desarrollo de dicha fórmula se utilizaron los datos de los análisis de 448 personas y aunque lleva mucho tiempo utilizándose es bien sabido los problemas que presenta en sueros con concentraciones altas de triglicéridos y/o de colesterol total.
La nueva fórmula que presentan ahora los autores se ha obtenido con los datos de 10664 personas brasileñas en los que se analizó el colesterol LDL por un método de determinación homogéneo sin centrifugación.
Posteriormente se utilizó un análisis matemático de regresión lineal y no lineal para obtener la mejor fórmula de cálculo del colesterol LDL, que reflejara los valores reales del colesterol LDL. La nueva formula utiliza solamente los valores del colesterol total y del colesterol HDL, no necesitando los valores de los triglicéridos
La nueva formula es la siguiente:
LDLc=3/4 (CT-HDLc)
Con esta nueva fórmula el coeficiente de correlación con el valor real de LDLc fue del 0.93 que nos proporciona una mejor correlación que con la fórmula clásica cuyo coeficiente de correlación fue del 0.87. Además también proporcionó una mayor exactitud.
La nueva fórmula superó a varias otras fórmulas de calculo del LDLc, en un amplio intervalo de valores del HDLc, CT y TG, por lo que está totalmente justificada su validación y aplicación en otras poblaciones.
La determinación del colesterol LDL (LDLc) es una de las más solicitadas para la evaluación del riesgo cardiovascular.
Durante mucho tiempo se ha utilizado para calcularlo la conocida fórmula de Friedewald, desarrollada por el autor y sus colegas en 1972.Esta conocida fórmula necesita de los valores del colesterol Total (CT), del colesterol HDL (HDLc) y de los triglicéridos (TG) para su cálculo. Es la siguiente:
LDLc= CT-(HDLc+0,2*TG)
Para el desarrollo de dicha fórmula se utilizaron los datos de los análisis de 448 personas y aunque lleva mucho tiempo utilizándose es bien sabido los problemas que presenta en sueros con concentraciones altas de triglicéridos y/o de colesterol total.
La nueva fórmula que presentan ahora los autores se ha obtenido con los datos de 10664 personas brasileñas en los que se analizó el colesterol LDL por un método de determinación homogéneo sin centrifugación.
Posteriormente se utilizó un análisis matemático de regresión lineal y no lineal para obtener la mejor fórmula de cálculo del colesterol LDL, que reflejara los valores reales del colesterol LDL. La nueva formula utiliza solamente los valores del colesterol total y del colesterol HDL, no necesitando los valores de los triglicéridos
La nueva formula es la siguiente:
LDLc=3/4 (CT-HDLc)
Con esta nueva fórmula el coeficiente de correlación con el valor real de LDLc fue del 0.93 que nos proporciona una mejor correlación que con la fórmula clásica cuyo coeficiente de correlación fue del 0.87. Además también proporcionó una mayor exactitud.
La nueva fórmula superó a varias otras fórmulas de calculo del LDLc, en un amplio intervalo de valores del HDLc, CT y TG, por lo que está totalmente justificada su validación y aplicación en otras poblaciones.
Ann Clin Biochem January 2013 vol. 50 no. 1 13-19
13 febrero 2013
Anticoagulante lúpico
Diagnóstico de laboratorio de la presencia de anticoagulante lúpico
Los inhibidores del tipo lupus pertenecen a la familia de los anticuerpos antifosfolípidos (APA). Su presencia es un marcador biológico para el síndrome antifosfolípidos.
Este síndrome está asociado a un alto riesgo de trombosis, perdidas fetales espontaneas recurrentes, trombocitopenia y otros signos clínicos.
El anticoagulante lúpico (AL) es también conocido como anticuerpo anticoagulante de la antiprotombinasa.
In vitro se manifiesta con tiempos de coagulación alargados en las pruebas en las que intervienen fosfolípidos, por ejemplo el Tiempo de protrombina (TP), el Tiempo parcial de tromboplastina activado (aPTT) y especialmente en el Tiempo del veneno de víbora de Russell diluido (dRVVT).
Hay que tener presente que algunos pacientes pueden desarrollar anticuerpos antifosfolípidos de manera transitoria debida a diversas cuasas que no tienen nada que ver como por ejemplo una infección y no van a presentar signos clínicos.
El diagnóstico correcto solo puede hacerse mediante pruebas de coagulación para AL y/o pruebas inmunológicas para APA.
La Sociedad Internacional de Trombosis y Hemostasia (ISTH) ha establecido una guía para el diagnóstico de laboratorio del AL que es lo que vamos a tratar de explicar aquí.
Los AL deben de ser detectados al menos en 2 ocasiones separadas por un intervalo mínimo de 12 semanas mediante una prueba de detección que seguirá el siguiente proceso:
1) Detección mediante una prueba de coagulación fosfolípido dependiente
a) La primera prueba que hay que hacer es la dRVVT
b) La segunda sería una aPTT sensibilizada con un activador de sílice y una baja concentración de fosfolípidos (aPTT-LA). Existen test ya preparados para esta prueba.
Es importante saber que deben de realizarse al menos 2 pruebas de este tipo antes de descartar el AL.
Si las dos pruebas dan tiempos alargados se pasa al paso siguiente.
2) Identificación de la presencia de un inhibidor de la coagulación
Para ello mezclaremos 50 % plasma del paciente con 50 % de un plasma de control (mejor un pool) que no contenga AL. Si la prueba se corrige se trata de un transtorno de la coagulación que afecta a uno o más de los siguientes factores de coagulación: VIII, IX, XI y/o XII:
Los pacientes con AL no corrigen la prueba de aPTT-LA con la adición de un plasma normal.
3) Una prueba de confirmación
Que indique que la inhibición es fosfolípido dependiente, con una prueba que contenga una alta concentración de fosfolípidos y que esté basada en el mismo principio que la prueba de detección.
4) Anticuerpos anti-cardiolipina IgG y/o IgM ( mediante un método ELISA estandarizado )
Pueden estar presentes en el suero o el plasma del paciente con AL en concentraciones de >40 al menos en 2 ocasiones separadas un intervalo mínimo de 12 semanas.
5) Anticuerpos anti-glicoproteína I 132 (IgG y/o IgM) (mediante un método ELISA estandarizado)
Pueden estar así mismo presentes en el plasma o el suero del paciente en una o dos ocasiones separadas por un intervalo mínimo de 12 semanas.
Adicionalmente se pueden también detectar anticuerpos anti-protrombina IgG y/o IgM mediante un método ELISA estandarizado.
Los inhibidores del tipo lupus pertenecen a la familia de los anticuerpos antifosfolípidos (APA). Su presencia es un marcador biológico para el síndrome antifosfolípidos.
El anticoagulante lúpico (AL) es también conocido como anticuerpo anticoagulante de la antiprotombinasa.
In vitro se manifiesta con tiempos de coagulación alargados en las pruebas en las que intervienen fosfolípidos, por ejemplo el Tiempo de protrombina (TP), el Tiempo parcial de tromboplastina activado (aPTT) y especialmente en el Tiempo del veneno de víbora de Russell diluido (dRVVT).
Hay que tener presente que algunos pacientes pueden desarrollar anticuerpos antifosfolípidos de manera transitoria debida a diversas cuasas que no tienen nada que ver como por ejemplo una infección y no van a presentar signos clínicos.
El diagnóstico correcto solo puede hacerse mediante pruebas de coagulación para AL y/o pruebas inmunológicas para APA.
La Sociedad Internacional de Trombosis y Hemostasia (ISTH) ha establecido una guía para el diagnóstico de laboratorio del AL que es lo que vamos a tratar de explicar aquí.
Los AL deben de ser detectados al menos en 2 ocasiones separadas por un intervalo mínimo de 12 semanas mediante una prueba de detección que seguirá el siguiente proceso:
1) Detección mediante una prueba de coagulación fosfolípido dependiente
a) La primera prueba que hay que hacer es la dRVVT
b) La segunda sería una aPTT sensibilizada con un activador de sílice y una baja concentración de fosfolípidos (aPTT-LA). Existen test ya preparados para esta prueba.
Es importante saber que deben de realizarse al menos 2 pruebas de este tipo antes de descartar el AL.
Si las dos pruebas dan tiempos alargados se pasa al paso siguiente.
2) Identificación de la presencia de un inhibidor de la coagulación
Para ello mezclaremos 50 % plasma del paciente con 50 % de un plasma de control (mejor un pool) que no contenga AL. Si la prueba se corrige se trata de un transtorno de la coagulación que afecta a uno o más de los siguientes factores de coagulación: VIII, IX, XI y/o XII:
Los pacientes con AL no corrigen la prueba de aPTT-LA con la adición de un plasma normal.
3) Una prueba de confirmación
Que indique que la inhibición es fosfolípido dependiente, con una prueba que contenga una alta concentración de fosfolípidos y que esté basada en el mismo principio que la prueba de detección.
4) Anticuerpos anti-cardiolipina IgG y/o IgM ( mediante un método ELISA estandarizado )
Pueden estar presentes en el suero o el plasma del paciente con AL en concentraciones de >40 al menos en 2 ocasiones separadas un intervalo mínimo de 12 semanas.
5) Anticuerpos anti-glicoproteína I 132 (IgG y/o IgM) (mediante un método ELISA estandarizado)
Pueden estar así mismo presentes en el plasma o el suero del paciente en una o dos ocasiones separadas por un intervalo mínimo de 12 semanas.
Adicionalmente se pueden también detectar anticuerpos anti-protrombina IgG y/o IgM mediante un método ELISA estandarizado.
10 enero 2013
Determinación de Levamisol
Métodos analíticos para la cuantificación de Levamisol como adulterante común de la cocaína
El Levamisol fue descubierto por la empresa farmacéutica Janssen Pharmaceutica en el año 1966 como antihelmíntico y se utilizó como tal en humanos y animales. Posteriormente fue utilizado por sus propiedades antiinflamatorias en el tratamiento de la artritis reumatoide, el síndrome nefrótico y en otras enfermedades incluido el cáncer.
Sin embargo en 1976 se descubrieron varios casos de pacientes tratados con Levamisol que desarrollaron leucopenia y agranulocitosis. En 1978 apareció el primer caso de un paciente con vasculitis secundaria al uso de Levamisol. Debido a estos problemas fue retirado del mercado humano entre el año 2000 y 2003, aunque se sigue comercializando como antihelmíntico para el ganado.
En el año 2003 se descubrió que los traficantes de cocaína estaban adulterandola con Levamisol. El motivo exacto de utilizar Levamisol como adulterante de la cocaína se desconoce. Tiene un color y un sabor muy similares a los de la cocaína pero además parece ser que tiene un efecto potenciador de los efectos de la misma.
Al parecer aumenta la actividad del sistema simpático periférico y los neurotransmisores de origen central a través de los receptores nicotínicos y acetilcolínicos, lo que resulta en un aumento de la euforía provocada por la propia cocaína.
Como resultado del aumento importante del uso de cocaína en los últimos 15 años, han aparecido bastantes casos de personas que han desarrollado leucopenia, agranulocitosis, vasculitis y otras complicaciones al tomar cocaína adulterada con Levamisol.
Esta revisión está enfocada a los varios métodos bioanalíticos disponibles para la determinación de Levamisol en plasma y orina humanos.
Los primeros métodos empleados fueron la cromatografía de gases acoplada con nitrógeno selectivo termoiónico y nitrogeno-fósforo como detección, así como la cromatografía líquida de alta resolución con detección ultravioleta.
Adicionalmente también se han descrito la cromatografía gases masas (GC-MS) y la cromatografía líquida de alta resolución en tandem con espectrometría de masas (LC-MS/MS).
Actualmente la GC-MS parce ser el método de elección, aunque recientes avances en el area de la LC-MS/MS están haciendo de esta tecnología una alternativa atractiva.
El artículo analiza en profundidad las ventajas e inconvenientes de estos dos métodos.
Se analizan además nuevos métodos emergentes como el uso de la espectrometría de movilidad- espectrometría de masas (DMS-MS), la capilaridad quiral por cromatografía de gases con detector de fluorescencia (GC-FID) y la tecnología de biochips array.
Sin embargo en 1976 se descubrieron varios casos de pacientes tratados con Levamisol que desarrollaron leucopenia y agranulocitosis. En 1978 apareció el primer caso de un paciente con vasculitis secundaria al uso de Levamisol. Debido a estos problemas fue retirado del mercado humano entre el año 2000 y 2003, aunque se sigue comercializando como antihelmíntico para el ganado.
En el año 2003 se descubrió que los traficantes de cocaína estaban adulterandola con Levamisol. El motivo exacto de utilizar Levamisol como adulterante de la cocaína se desconoce. Tiene un color y un sabor muy similares a los de la cocaína pero además parece ser que tiene un efecto potenciador de los efectos de la misma.
Al parecer aumenta la actividad del sistema simpático periférico y los neurotransmisores de origen central a través de los receptores nicotínicos y acetilcolínicos, lo que resulta en un aumento de la euforía provocada por la propia cocaína.
Como resultado del aumento importante del uso de cocaína en los últimos 15 años, han aparecido bastantes casos de personas que han desarrollado leucopenia, agranulocitosis, vasculitis y otras complicaciones al tomar cocaína adulterada con Levamisol.
Esta revisión está enfocada a los varios métodos bioanalíticos disponibles para la determinación de Levamisol en plasma y orina humanos.
Los primeros métodos empleados fueron la cromatografía de gases acoplada con nitrógeno selectivo termoiónico y nitrogeno-fósforo como detección, así como la cromatografía líquida de alta resolución con detección ultravioleta.
Adicionalmente también se han descrito la cromatografía gases masas (GC-MS) y la cromatografía líquida de alta resolución en tandem con espectrometría de masas (LC-MS/MS).
Actualmente la GC-MS parce ser el método de elección, aunque recientes avances en el area de la LC-MS/MS están haciendo de esta tecnología una alternativa atractiva.
El artículo analiza en profundidad las ventajas e inconvenientes de estos dos métodos.
Se analizan además nuevos métodos emergentes como el uso de la espectrometría de movilidad- espectrometría de masas (DMS-MS), la capilaridad quiral por cromatografía de gases con detector de fluorescencia (GC-FID) y la tecnología de biochips array.
Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (CCLM) Volume 51, Issue 1, Pages 205–212
23 noviembre 2012
aPTT prolongado
Tiempo parcial de tromboplastina activado (aPTT) prolongado ¿Cual es la estrategia a seguir ?
Cuando nos encontramos con un Tiempo parcial de tromboplastina activado prolongado (aPTT) en el laboratorio ¿que pasos debemos dar para establecer un diagnóstico correcto del problema?
Intentaremos contestar fundamentalmente a esta pregunta junto con las siguientes cuestiones interesantes:
Debería de repetirse el test en una nueva muestra de sangre asegurandonos de lo siguiente:
Básicamente el aPTT se ve afectado por los siguientes factores de la coagulación: XII, XI, X, IX, VIII, V, II, I, así como el cininógeno de alto peso molecular y la precalicreína.
Es impresindible la medicion del PT y del Tiempo de Trombina (TT). Si estos dos test son normales las deficiencias de factor X, V, II y I son poco probables así como la contaminación con heparina. (ver el esquema más abajo).
Las deficiencias de factor VIII y IX así como las deficiencias importantes de factor XI se asocian siempre con problemas hemorrágicos, mientras que deficiencias importantes de cininógeno, precalicreína y factor XII raramente se asocian a sangrados, por lo que una vez más la historia clínica del paciente es importante.
Problemas genéticos hereditarios que causan deficiencias son; la hemofilia A (Factor VIII), la hemofilia B ( Factor IX) y la hemofilia C ( Factor X) .
Las deficiencias adquiridas de estos factores se suelen deber a enfermedades subyacentes ( por ejemplo cirrosis hepática) o sangrados muy importantes.
En las disminuciones de factor VIII puede estar implicada su proteína transportadora, es decir el factor Von Willebrand, por lo que es aconsejable cuantificarlo mediante el antígeno del factor Von Willebrand y la actividad funcional del mismo con la ristocetina como cofactor. La enfermedad de Von Willebrand tiene variantes congenitas y adquiridas. La enfermedad adquirida puede ocurrir como un síndrome paraneoplásico o ser debida a una degradación de los multímeros de alto peso molecular ( se puede detectar por un análisis de multímeros) en los casos de destrucción mecánica ( por ejemplo protesis de valvulas cardíacas).
También pueden deberse a la presencia de anticuerpos anti-fosfolípidos inespecíficos o inhibidores específicos del factor VIII.
Los inhibidores específicos se pueden cuantificar con el test de Bethesda o su modificación de Nijmegen.
A continuación se puede ver el esquema de actuación en los aPTT prolongados.
Clinical Chemistry October 2012 vol. 58 no. 10 1402-1405
Intentaremos contestar fundamentalmente a esta pregunta junto con las siguientes cuestiones interesantes:
- ¿Cual es el diagnóstico diferencial en los aPTT prolongados ?
- La nueva generación de anticoagulantes ¿De qué modo afectan al aPTT y durante cuanto tiempo prolongan sus efectos?
- ¿Qué técnicas deberíamos utilizar para evaluar la causa de un aPTT prolongodo ?
Debería de repetirse el test en una nueva muestra de sangre asegurandonos de lo siguiente:
- Extracción correcta de la sangre lo que incluye el llenado correcto de los tubos de anticoagulante.
- Evitar la contaminación con heparina ( por ejemplo debida a un catéter central )
- Evitar las muestras lipémicas, ictéricas, hemolizadas y las que tienen un hematocrito alto ya que la proporción de anticoagulante se altera y tienen más citrato de lo que deberían lo que interfiere en los test de aPTT.
- Adicionalmente la historia clínica es importante ya que basta que el paciente esté por ejemplo sometido a un tratamiento con heparina de bajo peso molecular a dosis terapéuticas para que se produzca un aumento del aPTT.
- Las dosis altas de antivitaminicos K producen prolongaciones del aPTT junto con aumentos del Tiempo de Protrombina (PT).
- Los nuevos anticoagulantes como el Dabigatran que son inhibidores directos de la trombina, también producen alargamientos del aPTT. Este fármaco tiene una vida media de 14 horas por lo que en general basta descontinuarlo 48 a 72 horas antes para que no afecte al aPTT.
Básicamente el aPTT se ve afectado por los siguientes factores de la coagulación: XII, XI, X, IX, VIII, V, II, I, así como el cininógeno de alto peso molecular y la precalicreína.
Es impresindible la medicion del PT y del Tiempo de Trombina (TT). Si estos dos test son normales las deficiencias de factor X, V, II y I son poco probables así como la contaminación con heparina. (ver el esquema más abajo).
Las deficiencias de factor VIII y IX así como las deficiencias importantes de factor XI se asocian siempre con problemas hemorrágicos, mientras que deficiencias importantes de cininógeno, precalicreína y factor XII raramente se asocian a sangrados, por lo que una vez más la historia clínica del paciente es importante.
Problemas genéticos hereditarios que causan deficiencias son; la hemofilia A (Factor VIII), la hemofilia B ( Factor IX) y la hemofilia C ( Factor X) .
Las deficiencias adquiridas de estos factores se suelen deber a enfermedades subyacentes ( por ejemplo cirrosis hepática) o sangrados muy importantes.
En las disminuciones de factor VIII puede estar implicada su proteína transportadora, es decir el factor Von Willebrand, por lo que es aconsejable cuantificarlo mediante el antígeno del factor Von Willebrand y la actividad funcional del mismo con la ristocetina como cofactor. La enfermedad de Von Willebrand tiene variantes congenitas y adquiridas. La enfermedad adquirida puede ocurrir como un síndrome paraneoplásico o ser debida a una degradación de los multímeros de alto peso molecular ( se puede detectar por un análisis de multímeros) en los casos de destrucción mecánica ( por ejemplo protesis de valvulas cardíacas).
También pueden deberse a la presencia de anticuerpos anti-fosfolípidos inespecíficos o inhibidores específicos del factor VIII.
Los inhibidores específicos se pueden cuantificar con el test de Bethesda o su modificación de Nijmegen.
A continuación se puede ver el esquema de actuación en los aPTT prolongados.
Clinical Chemistry October 2012 vol. 58 no. 10 1402-1405
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