10 Preguntas sobre los análisis del SIDA

10 Preguntas sobre los análisis del SIDA

Muchas personas se hacen preguntas acerca de sus análisis clínicos, especialmente si son sobre el SIDA. Les surgen dudas sobre qué exactamente significan los resultados que le ha dado el laboratorio y qué fiabilidad tienen.

Vamos a repasar en este artículo las 10 preguntas que nos hacemos más frecuentemente al hacernos estos análisis.

1) ¿Qué es exactamente un análisis de SIDA?

Cuando acudimos al médico porque necesitamos hacernos la prueba del SIDA, en realidad lo que este solicita al laboratorio es una prueba de detección de anticuerpos anti-VIH. Es decir el laboratorio va a buscar si tenemos anticuerpos frente al Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH).

Hay que resaltar que existen 2 cepas de virus del SIDA el 1 y el 2, la mayoría de los laboratorios detectan ambos en la misma prueba.

2) ¿Que fiabilidad tiene la prueba de detección de anticuerpos anti-VIH 1/2 ?

Esto va a depender del método que el laboratorio utilice. Para una técnica de ELISA, que es la más frecuentemente utilizada la sensibilidad y la especificidad del resultado es aproximadamente del 99 % aproximadamente. Hay una tasa de falsos positivos y falsos negativos inferior al 2 %.

3) ¿Cuánto tiempo hay que esperar desde el momento del supuesto contagio para realizarse la prueba ?

Los anticuerpos del SIDA suelen aparecer entre 1 a 4 meses después, pero ha habido algunos casos en los que han aparecido incluso después de los 12 meses del contagio. Por eso es necesario realizarse la prueba a los 3 meses y posteriormente al año de esa primera prueba para tener una buena seguridad.

4) ¿ Hay que hacer otro tipo de análisis si la prueba da Positivo?

Dado que como hemos dicho existe un porcentaje de falsos positivos, todo resultado Positivo debe de confirmarse mediante otra prueba diferente, generalmente se usa el Western-Blot. Actualmente también esta disponible la prueba de detección del Antígeno      ( Es decir del DNA y RNA del propio virus) mediante una técnica de PCR (Polimerasa en cadena). En el caso de que 2 pruebas de anticuerpos por ELISA , una de Western-Blot o una de PCR hayan dado Positivo, se dice que la persona es Seropositiva.

5) ¿ Es lo mismo ser Seropositivo que tener el SIDA?

No es lo mismo. Ser Seropositivo es que el virus ha entrado en nuestro organismo, pero no necesariamente ha comenzado a atacarlo. Si no se hace nada con el tiempo, el individuo Seropositivo desarrollará inexorablemente el SIDA.

6) ¿ Que son los análisis de CD4 y CD8 ?

Son unos análisis destinados a evaluar el estado inmune de nuestro organismo. Se trata de 2 estirpes de linfocitos T. El SIDA hace que disminuyan los linfocitos CD4 (linfocitos del subgrupo colaborador-inductor) y aumenten los CD8 (subgrupo represor). Estos análisis se realizan mediante citometría de flujo. El cociente normal CD4/CD8 es de 2,0, pero los pacientes con SIDA presentan un cociente invertido, inferior a 1,0.

7) ¿ Porque es importante si los linfocitos CD4 son más bajos de 500/ mm3 ?

Porque este es el nivel por debajo del cual se presentan neumonías por Pneumocystis jirovecii (antiguamente P. carinii) y la posibilidad del Sarcoma de Kaposi. Por debajo de esta cifra debe de darse tratamiento antirretrovírico.

8) ¿Que es el análisis del p24 ?

Se trata de un antígeno del virus que es muy específico , pero con una baja sensibilidad. Se utiliza en casos de detección precoz de infección por VIH antes de la seroconversión. También en el diagnóstico del VIH en recién nacidos de madres seropositivas y en algunos otros casos más complejos.

9) ¿ Cómo se puede diferenciar entre el VIH 1 y el VIH 2?

La única forma de hacerlo es a través de un análisis cuantitativo de RNA.

10) ¿ Que sucede si he dado Positivo en una prueba de anticuerpos anti-VIH pero he dado un resultado dudoso en la prueba de Western-Blot ?

Si este es el caso, habría de hacerse una repetición del Western-Blot al cabo de 4-6 meses. Si el resultado sigue siendo dudoso, lo mejor es realizarse una prueba de PCR para el virus del SIDA. Si el resultado es Negativo, no estás infectado. Si el resultado es Positivo sí estas infectado.

Caso Clínico

Mujer con hipertensión e hipopotasemia. Demasiado de algo bueno ¡¡
 
Se trató de una mujer de 64 años de edad con antecedentes de esquizofrenia paranoide, hipertensión, hiperlipidemia e hipopotasemia crónica inexplicada. Su historia y la revisión no reveló hallazgos significativos. Su medicación incluía un suplemento oral de potasio sin receta (equivalente a 2,5 mmol, 3 veces al día) y olanzapina (10 mg al día). Ella parecía estar bien, y su examen físico era bueno, salvo para la hipertensión arterial (188/105 mm Hg). Se obtuvo una muestra sanguínea y se realizó una análitica de rutina.

La evaluación de laboratorio demostró que las concentraciones de los siguientes parametros estaban dentro de los intervalos de referencia; sodio en suero del paciente (142 mmol / L), nitrógeno ureico en [2,9 mmoles / L (8 mg / dL)], la creatinina [53 mmol / L (0,6 mg / dL)], [magnesio 1,0 mmol / L (2,4 mg / dL)], y la glucosa [5,2 mmol / L (94 mg / dL)]. Su dióxido de carbono total fue elevado a 43 mmol / L (intervalo de referencia 22-32 mmol / L), y su potasio sérico fue críticamente bajo en 1,9 mmol / L (intervalo de referencia 3.7-5.2 mmol / L). El resultado del potasio motivó el traslado del paciente al servicio de urgencias.

En el servicio de urgencias, la paciente fue persistentemente hipertensa (170-180/95-110 mmHg). La revisión de los registros anteriores de la paciente mostró una hipopotasemia anterior (2,1 y 3,3 mmol / L). Su electrocardiograma fue normal. La paciente no refirió el uso de diuréticos, abuso de laxantes, ayuno prolongado, diarrea o vómitos. La repetición del  potasio fue del 2,1 mmol / L, y en ese momento se calculó la osmolalidad en suero de 301 mOsm / kg. No se realizaron  mediciones de gases en sangre arterial o venosa. Una recolección de orina extemporanea arrojó una creatinina en orina de 884 mmol / L (10 mg / dl), sodio en orina de 73 mmol / L, potasio en la orina de 21 mmol / L, y osmolalidad urinaria de 226 mOsm / kg. Los hallazgos primarios anormales fueron la hipertensión con hipokalemia concurrente y alcalosis metabólica.

Diagnóstico diferencial 

La hipopotasemia con alcalosis metabólica presenta un amplio diagnóstico diferencial que puede ser sistemáticamente abordado mediante una  medición de potasio en la primera orina para descartar pérdidas por la piel y/o pérdidas gastrointestinales. La paciente presentó una concentración de potasio en la orina al azar de 21 mmol / L, lo que sugiere la pérdida renal de potasio. La medición de la excreción de potasio urinario en 24-h establecería definitivamente la pérdida excesiva, pero este procedimiento no se realizó debido a la rápida iniciación de los suplementos de potasio, que podrían confundir los resultados. El gradiente de potasio transtubular [(x Osmplasma orina K +) / (K + plasmático Osmurine x)], aunque más comúnmente utilizado para evaluar la hiperpotasemia, pueden ser rápidamente calculado y se encontró que  en este paciente era de 13,3, que era excesiva y  con esto se confirmó la pérdida excesiva de potasio renal.

La hipomagnesemia, que induce hipopotasemia se descartó en este paciente debido a que su concentración de magnesio estaba en el intervalo de referencia, y el aumento de dióxido de carbono elimina la posibilidad de la cetoacidosis diabética, acidosis tubular renal como causas.
La pérdida de potasio urinario puede ser causada por diuréticos tiazídicos. Estos diuréticos disminuyen la presión arterial, pero puede no ser suficiente para normalizar la hipertensión refractaria. Nuestro paciente negó el uso de diuréticos. También existen condiciones genéticas que fisiológicamente pueden imitar el uso de diuréticos. Este síndrome es una canalopatía autosómica recesiva del canal de Na-K-Cl en la rama gruesa ascendente del asa de Henle. Los pacientes con esta condición presente en la infancia presentan alcalosis metabólica y  aumento de potasio urinario, sodio y cloruro. El síndrome de Gitelman es una canalopatía autosómica recesiva del transportador de Na-Cl en el túbulo colector distal que puede imitar el hiperaldosteronismo y se puede presentar más adelante en la vida. Los pacientes con estos defectos genéticos suelen tener baja la presión arterial.

Entre los pacientes hipertensos con hipopotasemia y alcalosis metabólica, síndrome de Cushing o el exceso de mineralocorticoides estan el hiperaldosteronismo primario o secundario. Este paciente, sin embargo, tuvo la aldosterona baja y no tenía signos físicos compatibles con síndrome de Cushing.

El pseudohiperaldosteronismo presenta  la aldosterona y la renina bajas y puede deberse a causas genéticas o adquiridas. El síndrome de Liddle (canalopatía autosómica dominante del transporte de  Na / K en el tubo colector renal) se manifiestan a una edad más temprana. La deficiencia genética de deshidrogenasa tipo 11-β-hidroxiesteroide 2 (11β-HSD2) conduce a un exceso de mineralocorticoides aparente y en ocasiones se presenta en la edad adulta. La 11β-HSD2 normalmente es abundante en los túbulos renales y convierte selectivamente el cortisol a cortisona. En estados de deficiencia, el cortisol sin metabolizar rápidamente se une a los receptores de aldosterona y produce efectos mineralocorticoides como la retención de sodio y pérdida de potasio, lo que lleva a la hipertensión y la hipopotasemia. La alcalosis metabólica se produce como consecuencia de la hipopotasemia.
Las deficiencias de 11β-HSD2 son infrecuentes y pueden ser evaluadas mediante la secuenciación del ADN. La hiperplasia suprarrenal congénita se presenta con aldosterona baja, pero la forma de inicio tardío por lo general no produce importantes pérdidas de electrolitos. El síndrome ectópico de la hormona adrenocorticotropa o un adenoma suprarrenal secretor de desoxicorticosterona producirían también la aldosterona y la renina bajas.

Durante nuestra investigación y entrevistas con la paciente, reveló que estaba tomando varios suplementos a base de plantas, incluyendo un extracto suprarrenal  animal y aceite de regaliz negro. Los extractos suprarrenales están fabricados a partir de vaca cruda, cerdos, ovejas o las glándulas suprarrenales, no se sabe si proporcionan o no mineralocorticoides exógenos . Pero el aceite de regaliz negro era sospechoso de ser responsable de la condición de este paciente a través de su inhibición de la 11β-HSD2 ya que la regaliz puede producir hipertensión e hipocalemia.

El consumo de grandes cantidades de caramelos de regaliz negro se ha asociado con hipertensión e hipopotasemia. Sin embargo, la mayoría de los disponibles en la actualidad se mezclan con semillas de anís en lugar de la raíz cruda de la planta del regaliz, Glycyrrhiza glabra.
La raíz de regaliz contiene un principio biológicamente activo, la  glicirricina (ácido glicirrícico, ácido glicirricínico). La glicirricina es una saponina triterpenoide glucosídica utilizado como un edulcorante intenso en dulces y por sus presuntos efectos beneficiosos contra la inflamación, los virus, úlceras y molestias gastrointestinales. Sin embargo, la glicirricina inhibe el metabolismo del cortisol y puede dar lugar a casos agudos y crónicos de hipertensión severa e hipocaliemia.

PUNTOS PARA RECORDAR

    * La glicirricina se encuentra en alimentos elaborados a base de regaliz y suplementos e inhibe el metabolismo del cortisol renal en un 11 β-HSD2. Cuando el cortisol no se metaboliza, puede tener efectos mineralocorticoides sobre el riñón.

    * El consumo excesivo de glicirricina puede conducir a hipertensión e hipopotasemia y debe considerarse en el diagnóstico diferencial de los pacientes con estos hallazgos.

    * La hipertensión inducida por la regaliz y la hipocaliemia se pueden sospechar sobre la base de un coeficiente de aumento de cortisol a cortisona en la orina y puede ser confirmado mediante la medición de las concentraciones plasmáticas de glicirricina y en la resolución de los síntomas y anormalidades de laboratorio después de la retirada de la fuente de glicirricina.

Este caso ilustra que los suplementos que contienen regaliz pueden ser una causa potencial de hipertensión significativa e hipopotasemia. Tales suplementos deberían considerarse como posibles agentes causales en cualquier paciente con signos y síntomas compatibles con seudohiperaldosteronismo.

Clinical Chemistry. 2009;55:2093-2096.

Análisis de semen

Valores normales de semen humano de la Organización Mundial de la Salud (OMS)

Este artículo que se publica bajo la tutela de Trevor G. Cooper, el editor en jefe del Manual de análisis de semen de la Organización Mundial de la Salud (OMS), del que acaba de salir la última edición,WHO laboratory manual for the Examination and processing of human semen Fifth Edition (2010), recoge los valores de referencia del semen de una población fértil.

Es sabido que la calidad del semen se toma como una medida indirecta de la fecundidad masculina, muy útil en andrología clínica, fertilidad masculina, toxicología reproductiva, epidemiología y evaluación de riesgos en el embarazo.

En el presente trabajo se tomaron muestras de semen de 4.500 varones de 14 paises de 4 continentes, de diferente condición fértil y se seleccionaron aquellos que habían conseguido dejar embarazada a su pareja en un tiempo igual o inferior a 12 meses hasta el análisis, considerando este grupo como adecuado para proporcionar distribuciones de referencia de los distintos parametros del semen humano.

Se supone así mismo que este grupo es representativo de la población general.

Se obtuvieron los siguientes límites bajos de referencia ( 95% de intervalo de confianza):

Volumen del semen; 1,5 ml (1.4 a 1.7)

Número total de espermatozoides; 39 millones por eyaculado (33-46).

Concentración de espermatozoides; 15 millones por ml (12-16).

Vitalidad; el 58% vive (55-63)

Motilidad progresiva; el 32% (31-34),

Motilidad total (progresiva +no progresiva); el 40% (38-42)
Formas morfológicamente normales; el 4,0% (3,0-4,0)

Estos valores son los que publica en su 5ª Edición el Manual de la OMS.

En resumen la calidad del semen de la población de referencia fue superior a la de los hombres de la población en general y los hombres normozoospérmicos.

Hum Reprod Update. 2010 May-Jun;16(3):231-45.

Marcadores neurológicos

Marcadores neurobioquímicos de daño cerebral en líquido cefalorraquídeo en pacientes con accidente cerebrovascular isquémico agudo

La lesión isquémica del sistema nervioso provoca la activación y la desintegración celular, lo que lleva a la liberación de proteínas específicas en el líquido cefalorraquídeo (LCR).

En el presente estudio se investigaron las concentraciones en LCR de Proteína básica mielínica (MBP), proteína glial fibrilar astrocítica (GFAP), proteína S100B unida al calcio y la enolasa neuronal específica (NSE) en pacientes con ictus isquémico agudo y en con particular enfásis en la gravedad inicial, la ubicación del infarto, el volumen del infarto y el resultado a largo plazo del accidente cerebrovascular.

Se evaluaron las concentraciones de S100B, NSE, MBE y GFAP en 89 pacientes con ictus al ingreso ( media de 8,7 h. tras el ictus) y en 35 controles.

Los resultados que se obtuvieron fueron los siguientes:

Lo concentración de la PAM fue ligeramente superiores en infartos subcorticales que en infartos corticales (mediana de 1,18 frente a 0,66 mg/L)

Hay una correlación directa de la gravedad del accidente cerebrovascular con las concentraciones de proteínas GFAP y S100B.

Así mismo las concentraciones de ambas proteínas estan también relacionadas directamente con el volumen del infarto y con el resultado final del mismo.

En cambio las concentraciones de NSE no se correlacionan con las características de un derrame cerebral.

Clinical Chemistry. 2010;56:451-458

Nuevas tecnologías

Nuevas tecnologías en análisis de proteínas, tecnología Luminex®, Milliplex® y xMAP®

Estimados lectores hay una revolución en marcha desde hace ya algún tiempo pero que como toda nueva tecnología en analisis clínicos empezó en el terreno de la investigación.

Sin embargo es muy posible que se imponga en un plazo corto en la rutina diaria. Me refiero a las tecnologías Luminex®, Milliplex® y xMAP®.

Mediante estos sistemas para que nos hagamos una idea del potencial que representan, se pueden analizar hasta 100 proteínas diferentes ( hormonas, anticuerpos, antígenos, etc) en un solo pocillo a la vez, bastante rápidamente y con una gran fiabilidad.

¿ Como funciona esta tecnología?

Se trata de unas esferas, que pueden ser magnéticas o no, que pueden fijar en su superficie analitos específicos. 

Estas esferas vienen en grupos diferentes desde 1 hasta 100, marcadas con fluorocromos en diferentes proporciones.

Mediante un láser son excitadas primariamente emitiendo señales diferentes lo que permite identificarlas por separado en este primer paso.

Luego se utiliza un anticuerpo marcado con ficoeritrina contra la sustancia que se busca analizar. Mediante un segundo láser se puede saber entonces la presencia o ausencia de la sustancia que buscamos o incluso cuantificarla.

Esta tecnología permite realizar análisis tan interesantes como los siguientes:

• Proteínas de expresión.
• Citoquinas
• Enfermedades metabólicas
• Expresión genética focalizada
• Enfermedades autoinmunes
• Diagnóstico molecular de enfermedades
• Test de HLA
• Paneles de enfermedades infecciosas

Adicionalmente si las partículas son magnéticas mediante imanes se pueden hacer separaciones extraordinariamente efectivas.

TECNOLOGIA xMAP ®

¿Que nos deparará el futuro? Si esta tecnología se hace más asequible se podran hacer análisis extensos que requieren actualmente varias fases, en un solo paso y descartar patologías complejas en un tiempo extraordinariamente corto.
Pensemos por ejemplo que en las enfermedades infecciosas actualmente ya se necesitan analizar anticuerpos contra muchos virus diferentes en algunos casos en los que no se ve claro que padece el paciente.
Mediante estas tecnologías podrían analizarse hasta 100 enfermedades víricas de golpe con una cantidad de muestra insignificante.
Es emocionante vivir en estos tiempos en los que se estan produciendo estas revoluciones tecnológicas que nos llevaran a grandes avances médicos en un fúturo próximo.


* En los enlaces que hay en el post podeís ver esta tecnología con mucho mas detalle, incluso mediante animaciones en flash

Hemoglobina Glicosilada

Seis de los ocho aparatos más conocidos de point of care de Hemoglobina Glicosilada (HbA1c) no cumplen los criterios de rendimiento analítico generalmente aceptados

La hemoglobina Glicosilada (HbA1c) es una determinación ampliamente utilizada en el point of care (POC) ya que se utilizan instrumentos que proporcionan resultados rápidos en los centros de atención al paciente diabético.

En este trabajo se ha  investigado la conformidad de los diversos instrumentos de HbA1c de POC (IN2IT de Bio-Rad, de Siemens DCA Vantage, Afinion y Nycocard de Axis-Shield, Trébol de Infopia, InnovaStar de DiaSys, A1CNow de Bayer, y Quo-Test de Quoatest Diagnostic) con los criterios de rendimiento generalmente aceptados para la HbA1c.

Se utilizaron los protocolos de CLSI PE-10, EP-5, y EP-9 para investigar la imprecisión, la precisión y el sesgo.

Se evaluó el sesgo mediante 3 patrones certificados de referencia.

Así mismo se comparó con los criterios de certificación del Programa Nacional de Normalización de Glicohemoglobina (NGSP) utilizando 2 diferentes números de lote de reactivos para cada método de HbA1c.

Resultados: Debido a que los resultados de el EP-10 fueron decepcionantes, 2 de los 8 fabricantes decidieron no continuar la evaluación.Los resultados del CV total de PE-5 con un valor bajo y alto de Hb A1c fueron: IN2IT 4,9% y 3,3%, DCA Vantage 1,8% y 3,7%, Clover 4,0% y 3,5%, InnovaStar 3,2% y 3,9% Sólo el Afinion y el DCA Vantage aprobó los criterios NGSP con 2 diferentes números de lote de reactivos.

Conclusiones: Sólo el Afinion y el DCA Vantage cumplieron los criterios de aceptación de tener un total de CV<3% en el rango clínicamente relevante. El PE-9 y en los resultados de los cálculos de la certificación NGSP mostraron diferencias significativas en el rendimiento de análisis entre los diferentes números de lote de reactivos para todos los instrumentos de Hb A1c POC.

Clinical Chemistry. 2010;56:44-52

AUMENTO DE AST

Aumento persistente de Aspartato Aminotransferasa (AST) en paciente asintomático

Se trató de una mujer de 66 años sin antecedentes de enfermedad hepática preexistente que  presentó molestias en el pecho y  disnea. Los estudios de laboratorio revelaron un aumento aislado de  aspartato aminotransferasa (AST)  que llevó a la consulta con un hepatólogo.

La paciente era un maestra de escuela jubilada y no tomaba medicamentos. Afirmaba que bebía menos de 60 ml al día de bebidas alcoholicas.

El examen físico reveló una mujer de aspecto sano, sin anomalías evidentes. La esclerótica fue anictérica y el abdomen era blando, plano, y sin organomegalia palpable. No había edema.

Los estudios de laboratorio revelaron lo siguiente: AST, 544 U / L (intervalo de referencia, 11-47 U / L), albúmina, 38 g / L (36-50 g / L), alanina aminotransferasa (ALT), 23 U / L ( 7-53 U / L), fosfatasa alcalina (ALP), 95 U / L (38-126 U / L), bilirrubina total 4,0 mg / L (3.0-11 mg / L), bilirrubina directa, 2,0 mg / L (0.0-3.0 mg / L);) (gamma-glutamil transferasa (GGT), 25 U / L (11-50 U / L), lactato deshidrogenasa (LDH), 373 U / L (100-250 U / L); hemoglobina, 139 g / L (121-151 g / L), reticulocitos, 0.008 (0.005-0.015); haptoglobina, 0,97 g / L (0,27-2,20 g / L), hormona estimulante del tiroides, 3,60 mUI / L (0,35 -5,50 mUI / L), anticuerpos antinucleares, reactivos a 1:80 (negativo), anticuerpos anti-músculo liso, reactivos a 1:80 (<1:20); antimitocondriales, negativo;) (alfa 1-antitripsina, 1,67 g / L (0,7-2,1 g / L), ferritina, 202 mg / L (10-291 mg / L); ceruloplasmina, 380 mg / L (180-460 mg / L), antígeno de superficie de la hepatitis B, no reactivo, anticuerpos contra virus de la hepatitis C no reactivo, aldolasa 4,5 U / L (<8,0 U / L), y la creatina quinasa (CK), 116 U / L (38-234 U / L).

Los resultados de los estudios radiográficos, incluyendo ecografía abdominal y la tomografía computarizada de pecho fueron normales. Dado el aumento aislado de AST, sin signos o síntomas de enfermedad hepática, al paciente se le aconsejó dejar el consumo de alcohol, y el laboratorio clínico se puso en contacto para estudios adicionales.

Existen muchas causas posibles de enfermedad hepática pero ninguna encajaba con los datos clínicos y analíticos del paciente, así que se pensó en la posibilidad de Macroenzimas.

Las macroenzimas generalmente se deben a la formación de un complejo de enzima con autoanticuerpos, que tiene una masa molecular superior y un retraso en el aclaramiento que conduce a un aumento en la cantidad de enzima circulante.

Se han descrito macroenzimas para la amilasa, CK, ALP, AST, GGT, LDH, y la lipasa. La frecuencia de macroenzimas sigue siendo incierta. Se han publicado incidencias de las macroenzimas siguientes: macroamilasemia del 0,98% en los pacientes con concentraciones típicas de amilasa y 2,56% en aquellos con hiperamilasemia. Las macroenzimas se presentan con menos frecuencia en niños y adolescentes, y solo se han publicado  13 casos de macro-AST en este grupo de edad.

Aunque se ha notificado que las macroenzimas pueden estar asociadas a trastornos autoinmunes, como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, espondilitis anquilosante, crioglobulinemia y la enfermedad inflamatoria intestinal, no hay pruebas convincentes de que sean las causantes de la enfermedad, aunque algunos anticuerpos antienzima (como anti-peroxidasa tiroidea y anti-LKM1) se consideran marcadores de enfermedades autoinmunes. Curiosamente, esta paciente tenía un anticuerpo antinuclear reactivo.Aunque las macroenzimas generalmente no son consideradas patológicas, los valores persistentemente aumentados de la enzima pueden conducir a múltiples pruebas de diagnóstico invasivas y costosas.

Existen varios métodos para la detección de macroenzimas, incluyendo la electroforesis, precipitación diferencial con polietilenglicol o sulfato de amonio, las mediciones de estabilidad al calor, y la cromatografía de filtración en gel.Para investigar este paciente, se utilizó una forma simple y rápida para establecer la presencia de macroenzimas: la eliminación de la inmunoglobulina del suero, con proteína A o proteína G.Se procedió a la absorción de la posible macroenzima y esto fue lo que se obtuvo:

La Tabla 1 muestra que hubo un > 95% de reducción en AST cuando el plasma de este paciente fue absorbido con una proteína A o proteína G. Los valores de ALT y AST de control del paciente y los valores de ALT disminuyeron alrededor del 40%, como era de esperar por la simple dilución de la muestr.

Tabla 1 Recuperación de la actividad enzimática después de la absorción con proteína A y proteína G, corregida teniendo en cuenta la dilución de la muestra. (U/L)

   Muestra            No absorb.U         Prot.A                Prot. G 
Paciente AST              568                11 (3%)                13 (4%)
Control AST                564              395 (117%)         358 (106%)
Paciente ALT                25                17 (113%)            16 (107%)
Control ALT                863             599 (116%)           545 (105%)

La conclusión es que las macroenzimas son muy infrecuentes, pero deben de tenerse en cuenta en pacientes asintomáticos  con aumentos aislados  de enzimas, nos ahorraran costosas pruebas adicionales.

Clinical Chemistry. 2009;55:1573-1575.

DICKKOPF-1

Significado clínico y valor pronóstico de las concentraciones en suero de Dickkopf-1 (DKK1)  en pacientes con cáncer de pulmón

El Dickkopf-1 es una proteina secretada que actua como un regulador negativo de la vía de secreción de la Wnt, que tiene que ver con la homeostasis normal del hueso in vivo, y que ha sido implicada en varios tipos de cáncer. El significado clínico de la DKK1 en suero en el cáncer de pulmón está por determinar.

Se ha desarrollado un nuevo ensayo inmunofluorimétrico de tiempo resuelto para la determinación de DKK1.

Mediante este método los autores han medido las concentraciones de DKK1 en 592 pacientes con neoplasias malignas, 72 pacientes con enfermedad pulmonar benigna y 120 controles sanos. También se midieron los niveles de fragmento de citokeratina 19 y Enolasa neuronal específica en suero.

Los resultados han mostrado niveles significativamente mayores de DKK1 en pacientes con cáncer de pulmón que en los pacientes con otros tipos de neoplasias y enfermedades benignas de pulmón, así como en los controles sanos.

La utilización conjunta de los niveles de fragmentos solubles de citokeratina 19 junto con DKK1 consiguió identificar el 89,6 % de las neoplasias de pulmón de células no pequeñas.

En combinación con la Enolasa neuronal específica aumento la sensibilidad de detección del carcinoma de pulmon de celulas pequeñas hasta el 86,2 %.

La concentración de DKK1 aumentó con el estadío, el tipo de tumor, la presencia de nodulos linfáticos y metástasis independientemente de la edad, el sexo y la histología del paciente.

Los pacientes con un DKK1 de 22,6 mg/L o superior tuvieron una supervivencia significativamente menor, en comparación con los pacientes con un DKK1 más bajo.

Clinical Chemistry 55: 1656-1664, 2009.

FILTRADO GLOMERULAR ESTIMADO

Consideraciones sobre el cálculo del Filtrado Glomerular Estimado (FGE)

El calculo del FGE es de utilidad hoy día ya que es un criterio fundamental para el diagnostico de la enfermedad renal crónica (ERC)

De acuerdo a los criterios de la K/DOQI ( Kidney Disease Outcomes Quality Initiative) se entiende que existe ERC cuando se dan los 2 criterios siguientes:

1. La presencia de un filtrado glomerular inferior a 60 mL/min/ 1,73 m² durante un periodo de tiempo igual o superior a tres meses.

2. La presencia de lesión renal con o sin descenso del FG durante un periodo de tiempo igual o superior a tres meses. El concepto de lesión renal hace referencia a la presencia de alteraciones estructurales o funcionales del riñón puestas de manifiesto directamente, a partir de alteraciones histológicas en la biopsia renal o indirectamente, por la presencia de albuminuria, proteinuria, alteraciones en el sedimento urinario o mediante técnicas de imagen.

La combinación de estos dos criterios diagnósticos permite la clasificación en 5 estadios de la ERC.La valoración del FG es el mejor índice para evaluar la función renal. El FG se mide a través de la depuración o aclaramiento de una sustancia y corresponde al volumen de plasma del que ésta es totalmente eliminada por el riñón por unidad de tiempo. Muchas sustancias han sido propuestas para medir el aclaramiento y todas presentan ventajas e inconvenientes, siendo hoy por hoy la más utilizada la creatinina.

La concentración sérica de creatinina presenta variaciones importantes en función de la edad, sexo, etnia, masa muscular y tipo de dieta. Además, la relación entre la concentración sérica de creatinina y el FG no es lineal sino hiperbólica, lo que se traduce en una baja sensibilidad diagnóstica en la detección de ERC.

La evidencia científica existente indica que el aclaramiento de creatinina sobreestima el verdadero valor del FG, no proporcionando, en general, mejor estimación del mismo respecto al obtenido mediante el uso de ecuaciones que tengan en cuenta las variables de confusión que afectan la relación entre la concentración sérica de creatinina y el valor del FG.

Del mismo modo, las ecuaciones que han utilizado el aclaramiento de creatinina como “gold-standard” en su proceso de desarrollo y validación tienden a sobreestimar el verdadero FG.

Ecuaciones para la estimación del filtrado glomerular

Las ecuaciones de estimación del FG son más exactas y precisas que la valoración del mismo a partir de la medida exclusiva de creatinina.

Entre más de 40 ecuaciones de estimación del FG publicadas hasta la fecha, las más conocidas y validadas en distintos grupos de población son la ecuación de Cockcroft-Gault y la ecuación del estudio MDRD (“Modification of Diet in Renal Disease”).

Ecuaciones de estimación del filtrado glomerular (unidades convencionales)

MDRD - 4

FG estimado= 186 x (creatinina)^-1,154 x (edad)^-0,203 x (0,742 si mujer) x (1,210 si raza negra)

MDRD - 4 IDMS

FG estimado= 175 x (creatinina)^-1,154 x (edad)^-0,203 x (0,742 si mujer) x (1,210 si raza negra)

MDRD- 6

FG estimado =170 x (creatinina)^-0,999 x (edad)^-0,176 x (urea x 0,467)-0,170 x (albúmina)0,318 x (0,762 si mujer) x (1,180 si raza negra)

Cockcroft-Gault

Aclaramiento de creatinina estimado =(140 – edad) x peso x (0,85 si mujer) 72 x (creatinina)

Abreviaturas y unidades

FG: filtrado glomerular (mL/min/1,73m2) Aclaramiento de creatinina (mL/min) Edad (años) Peso (kg)

Creatinina: concentración sérica de creatinina (mg/dL) Urea: concentración sérica de urea (mg/dL) Albúmina: concentración sérica de albúmina (g/dL)

Líneas futuras de investigación

Las soluciones a los problemas actuales en la evaluación de la función renal incluyen el desarrollo de nuevas ecuaciones de estimación del FG con mayor exactitud diagnóstica, obtenidas a partir de métodos estandarizados de creatinina y/u otras magnitudes biológicas. Estas nuevas ecuaciones deberán obtenerse a partir de individuos representativos de la población en relación a la edad, sexo, etnia, índice de masa corporal, grado de filtrado glomerular, patologías asociadas, etc. y validarse en poblaciones independientes, frente a métodos de referencia de medida del FG

Asimismo, es imprescindible avanzar en la estandarización de los métodos de medida de creatinina a la vez que mejorar su imprecisión e inexactitud, para poder aplicar criterios de decisión clínica universales y disminuir la incertidumbre de los valores de FG estimados superiores a 60 mL/min/1,73m2.

Química Clínica 2006; 25 (5) 423-430 “Recomendaciones sobre la utilización de ecuaciones para la estimación del filtrado glomerular en adultos”

ACIDO LACTICO EN LCR

Cuantificación de Ácido Láctico en líquido cefalorraquídeo (LCR) en enfermedades neurológicas infecciosas y no infecciosas

El diagnóstico diferencial entre la meningitis bacteriana y vírica no resulta fácil en algunos casos.
El objetivo del presente estudio fue cuantificar el ácido láctico (LA) en LCR en las meningitis bacteriana y vírica así como en otras enfermedades del SNC, con el fin de determinar la utilidad diagnóstica de este marcador.
Se midió el LA en el LCR de 139 muestras clasificadas en 7 grupos a saber: meningitis vírica con LCR clásico, sospecha de meningitis vírica con neutrófilos, meningitis bacteriana, enfermedades neurológicas no infecciosas, meningitis crónica, punción lumbar traumática, y LCR normales.
Los resultados fueron que el LA en el LCR de las meningitis bacterianas fue más alto, 8,7 +5,4 mmol/L en comparación con la meningitis vírica, 1,9+0,6 mmol/L y con el resto de los grupos.
El nivel de LA en LCR en la meningitis vírica fue similar al del resto de los grupos.
La determinación de ácido láctico mostró, en la discriminación de meningitis bacteriana de vírica, una sensibilidad del 80 %, una especificidad del 97%, un valor predictivo positivo del 94% y un valor predictivo negativo del 89%.
La conclusión es que el LA en el LCR es un parámetro muy útil en el diagnóstico diferencial de las meningitis bactrianas y víricas especialmente en aquellos casos especialmente dudosos.

Clin Chem Lab Med. 2009;47(6):755-61.